Comparación entre Inmunofijación de proteínas en LCR e isoelectroenfoque para la detección de Bandas Oligoclonales

Fernández-Terán L.,Tamayo-Sánchez H.
Laboratorio de referencia internacional CARPERMOR, Ciudad de México.

INTRODUCCIÓN

La Esclerosis Múltiple (EM) es una enfermedad neurológica de etiología desconocida, que se caracteriza por presentar inflamación, desmielinización y degeneración axonal. A nivel mundial existen un gran numero de enfermedades neurológicas que presentan cuadros clínicos similares que no están relacionadas a una misma patología. Por ejemplo la miastenia gravis, lupus del sistema nervioso central, síndromes paraneoplásicos y de Guillain Barré, cuyos mecanismos están mediados por el sistema inmunológico, o las relacionadas a mecanismos infecciosos como meningitis, encefalitis y neurosífilis.

Existe evidencia que sugiere que la EM puede estar mediada por procesos autoinmunes y hasta 1950 su diagnóstico se realizaba únicamente a través de la clínica del paciente, aunque ya era bien sabido que esta enfermedad se caracteriza por una síntesis intratecal de IgG, no fue hasta ese año que se desarrolló la electroforesis en gel, que se pudo establecer un diagnóstico mas certero al separar e identificar distintos tipos de proteínas en LCR conocidas mas tarde como bandas oligoclonales (BOC).

Primeros resultados de gammaglobulinas por electroforesis de proteínas en LCR
y su avance hacia la inmunofijación de proteínas en LCR.

En 1959 el diagnóstico de la EM encontró su mas grande avance al desarrollarse la técnica de Isoelectroenfoque, sin embargo fue hasta el 2000 que se realizó un estudio comparativo de estas técnicas donde se encontró que la sensibilidad diagnostica se duplicaba en comparación con la electroforesis en gel.

OBJETIVO

Comprobar que el método de Isoelectroenfoque (IEF) presenta una mayor sensibilidad para la detección de síntesis intratecal de IgG con respecto de la inmunofijación de proteínas en gel (IFE).

MATERIALES Y MÉTODOS

Se analizaron 22 muestras de suero y LCR para inmunofijación de proteínas con el instrumento Interlab G26 e Isoelectroenfoque con el instrumento Hydrasys. Se compararon los resultados obtenidos con ambas metodologías.

RESULTADOS

De las 22 muestras de pacientes analizadas por ambas metodologías, en 3 de los casos analizados por IFE la interpretación de los resultados cambió cuando fueron analizados por IEF.

Lo anterior se traduce en un aumento del 14% en la detección de resultados positivos por IEF que disminuye en el mismo grado los falsos negativos por IFE. Estos resultados confirman lo reportado por Lunding y Midgard en el 2000 donde se obtuvo una sensibilidad de hasta el doble con respecto a la IFE.

DISCUSIÓN

La importancia de la detección de las BOC por IEF en LCR radica en que su presencia ha sido detectada en mas del 50% de los pacientes con EM, mientras que en estos mismos casos se reporta hasta un 90% de negatividad cuando se realiza únicamente el ensayo en suero. La determinación de BOC en LCR por IFE tiene la limitante de que los resultados positivos deben ser confirmados en una muestra de suero. Actualmente en Carpermor la determinación de BOC se realiza por IEF para lo cual se requiere el análisis simultaneo de LCR y suero para evidenciar la producción intratecal de inmunoglobulinas.

Interpretación de resultados de BOC por IEF.

Corrimiento simultáneo de muestra de LCR (n) y suero (n’). Caso 1: Muestra 2-2’. No se observan bandas en ninguna de las dos muestras. Resultado: BOC ausentes. Caso 2: Muestra 3-3’. Se observa presencia de bandas en LCR y ausencia en suero. Resultado: BOC presentes (síntesis intratecal). Caso 3: Muestra 5-5’. Se observa presencia de bandas en ambas muestras migrando a la misma altura, dispuestas a manera de espejo. Resultado: BOC ausentes (síntesis plasmática).

Conclusión o comentarios

Mediante las pruebas realizadas se determina, tal como lo reporta la literatura que la técnica de IEF es mas sensible para la identificación de bandas oligoclonales comparadas con la inmunofijación de proteínas en suero y LCR.

Bibliografía

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3. Sandra Viviana Pujadas1, Leticia Bibiana Madalena1, Paula Gabriela Murga1, María Laura Facio1, Mariel Emilce Alejandre1, Pablo Diego Bresciani1, Susana Alicia Fraind1, Marco Antonio Pizzolato 2.(2004). Perfil proteico en líquido cefalorraquídeo. Aporte al diagnóstico de esclerosis múltiple. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana, 38, 451-457. 08 de mayo de 2022, Incorporada al Chemical Abstract Service.